PAS (رنگ آمیزی اختصاصیی گلیکوژن)

 (PAS(Periodic acid schiff

واکنش PAS گلیکوژن و ریشه های کربوهیدرات دار را رنگ می کند بدین ترتیب که اسید پریودیک موجود در رنگ عامل هیدروکسیل گلیکوژن را اکسید کرده و ایجاد دی آلدئید می کند و دی آلدئید با معرف شیف رنگ قرمز ایجاد می نماید در رنگ آمیزی PAS همه پلی ساکاریدها رنگ می گیرند نه فقط گلیکوژن بنابراین پس از اینکه رنگ آمیزی مثبت شد یکبار دیگر رنگ آمیزی پس از مجاورت با دیاستاز انجام می شود که دیاستاز گلیکوژن را هیدرولیز می کند و لذا اگر واکنش پس از مجاورت با دیاستاز منفی شد نشاندهنده حضور گلیکوژن و در صورتیکه همچنان مثبت باقی ماند نشاندهنده حضور سایر پلی ساکاریدها است.کاربرد: 1-افتراق ALLمثبت از AMLمنفی 2- در رده میلوئید میلوبلاستها منفی و پرومیلوسیتها مثبت ضعیف بوده و از میلوسیت به بعد هر چه سلول رسیده تر می شود شدیدا مثبت می گردد3- در رده لنوئید لنفوسیتهای نرمال منفی و لنفوبلستهای لوسمیک به جزء L3 شدیدا مثبت می باشند.البته این رنگ آمیزی برای تعیین نوع لوسمی حاد چندان مناسب نیست و اغلب باعث تفسیر غلط می شود زیرا جواب مثبت اغلب بعنوان علامت ضرورری و اختصاصی برای تشخیص ALL محسوب می گردد. لازم به ذکر است که: ائوزینوفیلها ، منوسیتها ، بازوفیلها PAS مثبت و پلاکتها و مگاکاریوسیتها شدیدا مثبت و اریتروبلاستها بجزء M6 مثبت می باشند رنگ سودان سیاه B لیپوپروتئینها ، فسفولیپیدها و سایر چربی ها را به رنگ سبز یا سیز - سیاه رنگ می کند. اساس رنگ پذیری یک پدیده فیزیکی است رنگ از چربیهای خودش جدا شده وبه چربیهای لیپوپروتئین متصل می شود. این رنگ جانشین مناسبی برای پراکسیداز است زیرا حاوی بنزیدین سرطان زا نبوده و برای رنگ آمیزی نمونه هایی که تازه نبوده و فعالیت آنزیم پراکسیداز در آنها از بین رفته مفید است. البته رنگ آمیزی پراکسیداز برای تشخیص رده گرانولوسیت از رنگ آمیزی فوق اختصاصی تر است. کاربرد: همانند رنگ آمیزی پراکسیداز برای افتراق AML مثبت از ALL منفی است . سودان سیاه B چربیهای غشاء آتورراد را رنگ می کند پس در رده میلوئید میلوبلاستها منفی هستند ولی میلوبلاستها رسیده تر که حاوی آتور راد هستند مثبت می شوند و از پرومیلوسیت به بعد شدیدا مثبت می شوند. در رده لنفوئید ، لنفوسیتها و لنفوبلاستها منفی هستند لازم به ذکر است که ائوزینوفیلها مثبت قوی ، بازوفیلها مثبت ضعیف و منوسیتها متغییر می باشند. 

طرز تهیه آن در ادامه مطلب ذکر شده ....

ادامه نوشته

رنگ آمیزی گیمسا و کاربرد های آن

محلول گیمسا

 

 lnr7_12.jpg

به افتخار آقای رومانوسکی  romanowskyرنگ رایت ( wrigth-stian) و رنگ گیمسا (GIMSA-Stian) و.... بنام رنگهای رومانوسکی نامگذاری شدند.
اجزا و ساختمانهای اسیدی سلولها رنگهای قلیائی را می پذیرند لذا این ساختمانها را بازوفیلیک(قلیا دوست) دوستار مواد بازی گویند,مثل هسته سلول که در این رنگ آمیزی آبی رنگ میشود.
اجزا وساختمانهائی که فقط رنگینه های اسیدی را بخود راه میدهند اسیدوفیلیک (اسید دوست)یا ائوزینوفیلیک(ائوزین دوست) می نامند.این اجزا که در سیتو پلاسم بعضی سلولها قرار دارند با این رنگ آمیزی قرمز رنگ میشوند
اجزاوساختمانهائی که ترکیبی ازدو رنگینه هم رنگینه اسیدی هم رنگینه بازی را به خود راه میدهند نوتروفیلیک(خنثی دوست ) می نامند .
بهترین رنگ برای رنگ آمیزی گسترش خونی رنگ رایت+ گیمسا است.
رنگ گیمسا. این رنگ خود حاوی دو رنگینه است.1- رنگینه متیلن آبی 2- رنگینه ائوزین .
(رنگینه متیلن آبی خاصیت بازی دارد.) رنگینه متیلن آبی که خاصیت بازی دارد , قسمتهای اسیدی سلول را رنک می کند. قسمت اسیدی سلول مثل هسته سلول است به خاطر وجود نوکلئیک اسید(اسیدهای هسته ای) هسته سلول ها خاصیت اسیدی دارند.با این رنگ هسته سلول هاآبی تیره متمایل به بنفش میشه.

(رنگ ائوزین ساختار های بازی سلول را رنگ میکنه. رنگ ائوزین مثلا دانه های موجود در سیتوپلاسم سلول را رنگ میکنه. دانه هائی که خاصیت بازی دارند. با رنگ ائوزین به رنگ نارنجی درمیآیند. به عنوان نمونه دانه های موجود در سلول های ائوزینوفیل که با رنگ آمیزی گیمسا به رنگ نارنجی درمیآیند).

ادامه نوشته